我们在做实验时，常会遇到elisa试剂盒显色淡灵敏度偏低的问题，以下是根据不同问题可能原因及解决方法，仅供参考。
1、孵育反应时间不足
定闹钟准确定时；
2、洗涤时冲击力太大，洗涤液浸泡时间太长，洗涤次数增加
减少洗涤冲击力，按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数；
3、显色剂滴加量不足或顺序颠倒
混合后滴加显色液时，滴瓶垂直向下，持力均匀，滴速不宜过快，先加显色剂 A，反加显色剂B，不可将A、B液混合后加入；
4、显色剂反应时间不足
定闹钟准确定时；
5、蒸馏水水质有问题
测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响；
6、elisa试剂盒在运输途中时间太长，温度太高
试剂盒置保温箱内运输，并放足够数量的冰块，尽量缩短运输时间；
7、试剂、样品用前未能平衡
用前试剂、样品置室温平衡 30分钟左右；
8、样品和NaN 3 防腐，抑制了酶的反应
样品不能加 NaN 3 防腐；
9、试剂盒超过有效期
超过效期试剂盒不要使用；
10、试剂开启时间过长长菌
试剂开启后请尽量在短时间内用完；
11、移液器吸量不足，移液抽吸排放太快，吸头内壁挂液太多或内壁不清洁校正移液器
吸头要配套，每次装吸头要吻合紧密。移液不宜过快，排放应完全。吸头内壁要清洁，一次性使用；
12、elisa试剂盒恒温箱温度不足37℃或水浴锅水温度不足37℃
放入反应板时注意培养箱温度，及时调整，孵育反应期间开启不宜太多，影响温度平衡。
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