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    样本收集之组织样本的收集
    Article Source:江苏博深生物科技有限公司   add time:2021/11/18 16:52:17 CTR:2066

                                组织样本ELISA检测处理方法
    一、组织匀浆的制备 
    1、取组织块(0.1g0.5g)最少可到510mg在冰冷的PBS中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。 
    2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。 
    3、匀浆的方式:手工匀浆,机器匀浆。 
    ① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(68分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。 
    ② 机器匀浆:用组织捣碎机1000015000 / 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10/次,间隙30秒,连续35次,在冰水中进行,可适当延长匀浆时间),镜检观察:
    4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机3000/分左右,离心1015分钟,取上清液进行测定.
    二、匀浆介质  一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
    三、样本保存:         
    组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如不反复冻融,-20℃以下可保 存三个月,-70℃以下可保存六个月

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