ELISA实验加样可能碰到的问题及解决方法
在ELISA实验中一般有3次加样步骤,即加标本,加酶结合物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。在加样的过程中会碰到什么问题呢?让我们一起看一下实验过程中加样可能碰到的问题:
1、过长(特别是室内温度较高时);
2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间;
3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。血清或血浆标本分离不好即进行加样。
相应解决办法:
1、标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟; 若在几天内检测,可放在2- -8C冰箱中,若要贮存,则置于-20C 的低温冰箱内。
2、加样后及时放入孵箱。
3、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4、如果采用AI或其他全自动加样,选择F AMN或其他后处理仪器加酶试剂。
5、标本较多时,请分批操作。
|